Estudo da deformabilidade da membrana da hemacia com a pinca optica / Erythrocyte membrane deformability study with of the \"optical tweezer\"

A pinca optica, baseada na tecnica de transferencia de momentum de fotons para capturar e manipular particulas biologicas, foi desenvolvida por A. Ashkin et al. em 1987. Desde entao, ela tem sido utilizada em estudos de genetica molecular, fertilizacao assistida, dentre outros. Neste trabalho, utilizamos a pinca optica para estudar a deformabilidade da membrana da hemacia, com o auxilio de um laser Nd:YAG, cujo feixe e focalizado num microscopio Olympus com um aumento de ate 100 vezes. A hemacia, na sua funcao de captar o oxigenio dos pulmoes e leva-lo para todas as celulas atraves da hemoglobina, percorre todos os vasos sanguineos do organismo por aproximadamente 500.000 vezes, durante sua vida media de 120 dias, atravessando uma distancia de 250km...

Localización citoquímica ultraestructural de la actividad de ATPasa de Ca²+ en membranas de eritrocitos humanos invadidos por Plasmodium falciparum / Ultrastructural cytochemical localization of the Ca²+ ATPase activity in the membrane of human erythrocytes invaded by Plasmodium falciparum

Durante el proceso de invasión del eritrocito humano por Plasmodium falciparum el calcio juega un papel importante y su concentración es aumentada notablemnte con relación al eritrocito normal. En este trabajo se propuso determinar la presencia de bombas de calcio como la ATPasa de ca²+ en membranas de eritrocitos invadidos, con el fin de explicar el papel mediador que dicha bomba puede tener en el trasporte de calcio durante la invasión. Para detectar dicha actividad de la ATPasa de Ca²+ se estandarizó un método directo de precipitación de metales pesados en donde el fosfato es el producto de hidrólisis catalizada del ATP. Este método utiliza un medio de incubación que contiene todos los elementos necesarios para que la enzima pueda desarrollar su actividad de ATPasa. El producto de reacción de esta actividad se comprobó por la formación de un precipitado electrodenso que se deposita a lo largo de la superficie de membranas tanto de eritrocitos normales como de los invadidos. Para determinar la actividad de ATPasa en la célula completa mediante este método citoquímico, fué necesario modificar la concentración intracelular de calcio y permeabilizar dicha célula invadida. La actividad de ATPasa fué caracterizada mediante el uso de inhibidores como vanadato, ouabaína y EGTA demostrándose una actividad específica para ATPasa de Ca²+. La especificidad de ésta fué ratificada mediante el uso de inhibidores de calmodulina como trifluoperazina, W7, calmidazolium y un sustituyente de calcio como Lantano. Durante el ciclo asexual eritrocítico, la actividad en la membrana del eritrocito permaneció constante duratnte todo el ciclo y la membrana de la vacuola parasitófora mostró una mayor actividad en parásitos de 18-20 horas de crecimiento y posteriormente una disminución y pérdida de actividad durante la maduración del parásito. Se encontró actividad de ATPasa de Ca²+ en otras estructuras membranales como los clefts distribuídos en el citosol de la célula roja invadida

Lipoperoxidación de las membranas de eritrocitos como un posible indicador del estrés oxidativo en el paciente alcohólico / Lipoperoxidation of the erythrocyte membranes as a possible oxidative stress indicator in the alcoholic patient

En este trabajo se estudia la lipoperoxidación de las membranas del eritrocito de pacientes alcohólicos como un idicador de estrés oxidativo ocasionado por un exceso de radicales libres generadas durante la exposición crónica al consumo exagerado de etanol. Las membranas eritrocíticas de los pacientes alcohólicos presentan un incremento de la lipoperoxidación es más notable en los sujetos cuya última ingesta etílica ha sucedido dentro de las 24 h que anteceden al estudio. Al correlacionar con el tiempo de alcoholismo se observa que el aumento de la lipoperoxidación ocurre desde los primeros 10 años de consumo de etanol y guarda relación con la cantidad de alcohol en gramos consumida por día. Se concluye que la determinación de la lipoperoxidación en membranas de eritrocito es un indicador del daño membranal por la ingesta aguda o crónica del etanol

Lipid molecular shapes and membrane architecture.

A simple biomembrane like erythrocyte contains well over hundred lipid species with diverse molecular shapes differing in the number of acyl chains, chain length, unsaturation and head group composition. A delicate balance between these molecular shapes is necessary in order to have a functional membrane. It is well established that the activities of a number of membrane-bound enzymes and other properties such as aggregation, spontaneous vesiculation, pathophysiological properties and lipid-protein interactions of lipids depend on the acyl chain length, unsaturation and head group composition. In fact, the molecular shape of a phospholipid molecule, as modulated by changes in chain length, unsaturation and head group composition, is probably what is affecting the above mentioned properties. The molecular shape of a lipid depends on a dimensionless packing parameter, S, the value of which influences the size and shape of aggregate formed upon hydration. In fact, the additivity of S values of lipid mixtures explains a number of experimental observations. The molecular shape concept, although very simple, explains many membrane phenomena like complementarity of molecular shapes of non-bilayer lipids to form stable bilayers. Membrane permeability is controlled to a large extent by lipid packing which depends upon molecular shapes. In fact, membranes maintain their lamellar structure by delicately balancing the composition of bilayer-forming and non-bilayer-forming lipids indicating that complementarity of molecular shapes is essential to maintain the permeability barrier. Based on this, the complementary molecular shape model of cell membrane is proposed.